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服務(wù)介紹：

總谷胱甘肽(T-GSH)的試劑盒，其檢測原理是谷胱甘肽還原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)還原成還原型谷胱甘肽(GSH)，由GSSG還原成的GSH和樣品本身含有的GSH都與發(fā)色底物DTNB反應(yīng)，生成黃色的TNB和GSSG，前后兩個(gè)反應(yīng)合并起來，總谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相當(dāng)于一個(gè)呈色的限速反應(yīng)，總谷胱甘肽(T-GSH)含量決定了黃色含量，通過分光光度法(酶標(biāo)儀)測定410nm處吸光度，與相應(yīng)處理的GSH標(biāo)準(zhǔn)比較，獲得樣品的總谷胱甘肽(T-GSH)即(GSSG+GSH)含量，可用于測定血漿、血清、植物或動(dòng)物組織、細(xì)胞等樣品中總谷胱甘肽(T-GSH)含量。該試劑盒僅用于科研，不用于臨床診斷或其他用途。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：

實(shí)驗(yàn)流程：

試劑盒：

1、樣本接收：植物組織、動(dòng)物組織、紅細(xì)胞、血漿、細(xì)胞

2、實(shí)步驟：

(1)工作試劑的配制：還原型谷胱甘肽(GSH)標(biāo)準(zhǔn)加入ddH2O，溶解并混勻，即為還原型GSH標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存液。DTNB中加入 DMSO，溶解并混勻，即為DTNB儲(chǔ)存液。GSH還原酶原液：GSH Assay Buffer =1:49的比例混合，即為50×GSH還原酶。配制T-GSH檢測工作液。配制蛋白沉淀工作液。配制標(biāo)準(zhǔn)品：把還原型GSH標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)存液(10mM)用蛋白沉淀工作液稀釋成50μM標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后依次稀釋成25、15、10、5、2μM GSH溶液，取50、25、15、10、5、2μM GSH標(biāo)準(zhǔn)溶液6個(gè)點(diǎn)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。配制NADPH工作液。

(2)按照說明書設(shè)置的表格依次加樣。.

(3)全自動(dòng)生化儀自動(dòng)測定。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：全自動(dòng)生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運(yùn)輸要求：

以下所有樣本必須盡量新鮮!

1.動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量，按重量(mg): 體積(L)=1:9 的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦 0.86% 或 0.9% 的生理水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500-3000r/min，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測定。

2.血清樣本(干冰運(yùn)輸)

全血標(biāo)本請于室溫放置2h或4℃過夜后于 2-8℃3000r/min離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于 -20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

3.血漿樣本(干冰運(yùn)輸)

可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30min內(nèi)于2-8℃3000r/min離心15min，取上清即可立即檢測;或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測。

4.細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來，接著將培養(yǎng)液3000r/min離心 10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000r/min離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清:標(biāo)本于2-8℃3000r/min離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗(yàn)，或分裝后于-20或-80保存。避免反復(fù)凍融。

5.全血樣本(4℃運(yùn)輸)

EDTA抗凝管取適量抗凝全血時(shí)，EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL，樣本量不可太多或太少，取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運(yùn)輸，不可與冰袋直接接觸，不可猛烈撞擊。抗凝全血僅用于血常規(guī)檢測，不可運(yùn)輸后再離心取血漿。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！