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手動生化

服務(wù)詳情

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葡萄糖(檢測服務(wù))

葡萄糖(Glucose, Dextrose,Glu)又稱玉米葡糖,簡稱葡糖,化學(xué)式C6H12O6,分子量為180.16,是自然界分布最廣、最重要的一種單糖,屬于多羥基醛。用酶學(xué)方法測定葡萄糖是生化檢測中的常用方法,最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法,上述酶學(xué)法特點是:1、靈敏度、準確度、精密度均高;2、使用溫和的反應(yīng)條件;3、操作簡便;4、適用于自動分析儀,測定葡萄糖亦可通過鄰甲苯胺法、苯胺法、聯(lián)苯胺法等實現(xiàn)。

價格:¥20.00

規(guī)格:反應(yīng)

貨號:ST1535

品牌:LEAGENE

服務(wù)介紹:

    葡萄糖(Glucose, Dextrose,Glu)又稱玉米葡糖,簡稱葡糖,化學(xué)式C6H12O6,分子量為180.16,是自然界分布最廣、最重要的一種單糖,屬于多羥基醛。用酶學(xué)方法測定葡萄糖是生化檢測中的常用方法,最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法,上述酶學(xué)法特點是:1、靈敏度、準確度、精密度均高;2、使用溫和的反應(yīng)條件;3、操作簡便;4、適用于自動分析儀,測定葡萄糖亦可通過鄰甲苯胺法、苯胺法、聯(lián)苯胺法等實現(xiàn)。

貨號

名稱

規(guī)格

價格

ST1535

葡萄糖檢測試劑盒

反應(yīng)

20

實驗流程:

樣本處理:

①血清、血漿、腦脊液樣品:從待測樣品中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血,直接測定,如超過線性范圍(30mmol/L),用生理鹽水或PBS稀釋后測定。

細胞樣品:

a.取適量的細胞(一般推薦>106以上),1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。

b.用PBS或生理鹽水清洗1~2次,1000g離心10min,棄上清,留取沉淀。

c.加入200~300μl的PBS或生理鹽水勻漿,冰浴條件下超聲破碎細胞,功率300W,每次3~5s,間隔30s,重復(fù)3~5次;亦可手動勻漿,制備好的勻漿液不可離心;亦可用1~2% Triton X-100冰浴30~60min,制備好的裂解液不可離心。

③組織樣品:準確稱取適量組織樣品,按質(zhì)量(g):生理鹽水或PBS(ml)=1:9的比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴條件下手動或機械勻漿,2500~3000g離心10min,取上清。

Glu測定:

酶標儀、全自動生化分析儀Glu測定

加入物(μl)

空白孔

標準孔

測定孔

ddH2O

3

Glu標準(5mmol/L)

3

待測樣品

3

GOD-POD工作液

300

300

300

 

分光光度計(1ml比色杯)、半自動生化分析儀Glu測定

加入物(ml)

空白管

標準管

測定管

ddH2O

0.01

Glu標準(5mmol/L)

0.01

待測樣品

0.01

GOD-POD工作液

1

1

1

 

普通分光光度計(2ml比色杯)Glu測定

加入物(ml)

空白管

標準管

測定管

ddH2O

0.02

Glu標準(5mmol/L)

0.02

待測樣品

0.02

GOD-POD工作液

2

2

2

   各種儀器按上表依次加入試劑。

充分混勻, 37℃水浴中孵育15min。

③立即用相應(yīng)儀器測定505nm處吸光度,以空白孔(管)調(diào)零,讀取標準孔(管)、測定孔(管)的吸光度,分別記為A標準、A測定

機器參數(shù):

主波長

505nm

反應(yīng)類型

終點法

反應(yīng)方向

升反應(yīng)(+)

 

實驗結(jié)果:全自動生化儀檢測后導(dǎo)出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求:

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心,然后檢測。

4、細胞樣本

貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

細胞上清:標本于2-8℃,3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復(fù)凍融。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!

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