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服務(wù)介紹：

膽固醇及其脂在強(qiáng)酸存在下與鄰苯二甲醛反應(yīng)，產(chǎn)生紫紅色化合物，該化合物在550nm波長處有最大吸收峰，分光光度計(jì)在550nm處進(jìn)行比色測(cè)定，膽固醇含量在4mg/ml之內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示：

實(shí)驗(yàn)流程：

試劑盒：

1、樣本接收：血清、血漿、細(xì)胞、組織、腦脊液

2、實(shí)驗(yàn)步驟：

(1)工作試劑的配制：

①配制膽固醇標(biāo)準(zhǔn)工作液：按膽固醇標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)：TC Assay Buffer=1：9的比例準(zhǔn)確混合

②配制鄰苯二甲醛工作液：取1瓶(10mg)鄰苯二甲醛粉劑的準(zhǔn)確加入鄰苯二甲醛稀釋液10ml，充分混勻。

③配制強(qiáng)酸工作液：取適量的濃硫酸加入到等量的TC Assay Buffer中混合。

      (2)按照說明書設(shè)置的表格依次加樣。

      (3)膽固醇測(cè)定：充分混勻, 靜置10min，1cm比色杯，以分光光度計(jì)測(cè)定550m吸光度，以空白管調(diào)零，讀取標(biāo)準(zhǔn)管和各待測(cè)管的吸光度。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運(yùn)輸要求：

以下所有樣本必須盡量新鮮!

1.動(dòng)植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)

準(zhǔn)確稱取動(dòng)物組織重量，按重量(mg): 體積(L)=1:9 的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦 0.86% 或 0.9% 的生理水)，冰水浴條件下，機(jī)械勻漿，制備成10%的勻漿液，2500-3000r/min，離心10分鐘，取上清液進(jìn)行測(cè)定。

2.血清樣本(干冰運(yùn)輸)

全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2h或4℃過夜后于 2-8℃3000r/min離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于 -20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

3.血漿樣本(干冰運(yùn)輸)

可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30min內(nèi)于2-8℃3000r/min離心15min，取上清即可立即檢測(cè);或進(jìn)行分裝，并將標(biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。解凍后的樣本應(yīng)再次離心，然后檢測(cè)。

4.細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞:將細(xì)胞用PBS沖洗2次后，用細(xì)胞刮將細(xì)胞小心刮下來，接著將培養(yǎng)液3000r/min離心 10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

懸浮細(xì)胞:將培養(yǎng)液3000r/min離心10min。棄上清留細(xì)胞沉淀，干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞上清:標(biāo)本于2-8℃3000r/min離心15min取上清，上清立即用于實(shí)驗(yàn)，或分裝后于-20或-80保存。避免反復(fù)凍融。

5.全血樣本(4℃運(yùn)輸)

EDTA抗凝管取適量抗凝全血時(shí)，EDTA與血液最佳比例為1.5mg:1mL，樣本量不可太多或太少，取樣后上下輕輕顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻。4℃運(yùn)輸，不可與冰袋直接接觸，不可猛烈撞擊?？鼓獌H用于血常規(guī)檢測(cè)，不可運(yùn)輸后再離心取血漿。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！